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elisa试剂盒试验原理
点击次数:201 发布时间:2017-12-25
 

elisa试剂盒试验原理

elisa试剂盒运用双抗体夹心法测定标本中大白鼠类风湿因子(RF)水平。用纯化的大白鼠类
风湿因子(RF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中顺次加入类风湿因子
(RF),再与 HRP 符号的类风湿因子(RF)抗体结合,构成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻
底洗刷后加底物 TMB 显。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝,并在酸的效果下转化成
终究的黄。彩的深浅和样品中的类风湿因子(RF)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下
测定吸光度(OD 值),经过规范曲线计算样品中大白鼠类风湿因子(RF)浓度。
elisa试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗刷液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响成果。
3.各步加样均应运用加样器,并常常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐运用排枪加样。
4. elisa试剂盒请每次测定的同时做规范曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
大于规范品孔榜首孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

 

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